目的  探讨多次住院后骨感染患者细菌谱及耐药性变化。  方法  采用回顾性病例系列研究分析沈阳军区总医院2009年1月— 2016年12月收治的95例外伤致骨感染患者的临床资料，其中男76例，女34例；年龄17～94岁，平均47岁。取骨创伤感染分泌物、感染骨组织等246个标本做细菌培养及药敏试验，统计全部标本的细菌种类及耐药性数据，并根据住院次数变化分别统计革兰阳性菌与革兰阴性菌的数量及比值变化，记录金黄色葡萄球菌多次住院后耐药性的变化。  结果  共分离出病原菌110株，混合感染占19%。革兰阳性球菌61株(55.5%)，其中金黄色葡萄球菌35株[耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株(MRSA)7株]，占革兰阳性球菌株的57%，其余主要的革兰阳性球菌有粪肠球菌、表皮葡萄球菌。革兰阴性杆菌48株(43.6%)，其中铜绿假单胞菌12株，占革兰阴性杆菌株的25%；肺炎克雷伯杆菌9株，占革兰阴性杆菌株的19%。金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率达82%。主要的革兰阳性球菌(金黄色葡萄球菌、肠类球菌、表皮葡萄球菌)均对万古霉素及利奈唑胺的敏感性较高。主要的革兰阴性杆菌(铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌)对二代头孢类抗生素耐药性较高，对碳青霉烯类抗生素具有较好的敏感性。95例骨感染患者首次住院时革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌检出数量比值为0.98，多次住院后这一比值变为3，数量比值变化差异有统计学意义(P<0.05)。多次住院后金黄色葡萄球菌对庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素等抗生素的耐药性逐渐升高，对青霉素的耐药率甚至高达100%(P<0.05)；对万古霉素或利奈唑胺敏感性较好。  结论  骨感染混合感染比较常见，其中金黄色葡萄球菌、粪肠球菌是主要革兰阳性致病菌，铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯杆菌为主要的革兰阴性致病菌。多次住院后革兰阳性球菌感染占比增加，成为主要致病菌。治疗多次住院金黄色葡萄球菌感染应避免使用青霉素，慎用庆大霉素、环丙沙星等耐药性较高的抗生素，宜选用较敏感的万古霉素或利奈唑胺。