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摘要 目的 探讨创伤后骨缺损组织工程骨(TEB)移植后,组织工程骨募集宿主骨髓间充质干细胞(BMSCs)参与骨重建的机制。 方法 体内实验:取8周龄FVB/N小鼠,切除股骨干中部2 mm骨干和骨膜,制作大段骨缺损。缺损处分别植入脱钙骨基质(DBM)和TEB并固定,所有小鼠按随机数字表法分为DBM组(18只)和TEB组(18只)。移植后24 h流式细胞术评价宿主BMSCs入血的数量,活体动物体内成像观察两组募集循环中小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)到达损伤区域的能力,ELISA法比较两组外周血中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)含量。体外实验:(1)迁移小室实验评估SDF-1(100 ng/ml)促进人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)迁移的能力,SDF-1/趋化因子受体4(CXCR4)通路通过选择性CXCR4拮抗剂普乐沙福(AMD3100)阻断,按处理因素分为对照组、SDF-1组和SDF-1+AMD3100组。(2)建立人脐静脉内皮细胞(hUVECs)、hBMSCs共培养体系并通过SDF-1刺激细胞,按共培养细胞和处理因素分为hBMSCs组、hBMSCs+hUVECs组和hBMSCs+hUVECs(AMD3100预处理)组。迁移小室实验比较各组hBMSCs迁移数量,ELISA法检测共培养上清的肝细胞生长因子(HGF)水平。(3)对体外培养的hUVECs分别通过SDF-1刺激以及AMD3100拮抗SDF-1/CXCR4,按处理因素分为对照组、SDF-1组和SDF-1+AMD3100组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)评价各组HGF表达。 结果 体内实验:骨缺损材料移植后24 h,TEB组外周血中间充质干细胞(MSCs)数量、SDF-1浓度与DBM组比较均有明显增高(P<0.05),TEB组募集的术后注射进入循环的mBMSCs多于DBM组(P<0.01)。体外实验:(1)单种细胞迁移小室实验中,相比对照组和SDF-1+AMD3100组,SDF-1组显著增强hBMSCs迁移能力(P<0.01)。(2)hBMSCs和hUVECs共培养体系迁移小室实验中,与hBMSCs组、hBMSCs+hUVECs(AMD3100预处理)组比较,hBMSCs+hUVEC组迁移细胞数量和HGF浓度均显著增多(P<0.01),而hBMSCs组与hBMSCs+hUVECs(AMD3100预处理)组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)qRT-PCR显示,与对照组比较,SDF-1组HGF表达明显升高(P<0.01)。拮抗SDF-1/CXCR4后,SDF-1+AMD3100组HGF表达与SDF-1组比较显著降低(P<0.05)。 结论 骨缺损TEB移植后可以显著提高体内趋化因子SDF-1水平,有效促进宿主MSCs的动员和循环中MSCs的募集。SDF-1不仅通过SDF-1/CXCR4直接促进hBMSCs的迁移,还可上调血管细胞HGF的表达和分泌,进一步放大SDF-1对hBMSCs的趋化作用。
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[1] |
张英泽. 中国共产党领导中国骨科不断发展壮大——写在中国共产党百年华诞之际[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 577-579. |
[2] |
付小兵. 中国组织修复与再生医学健康发展的思考与实践[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 580-585. |
[3] |
中国医师协会骨科医师分会脊柱创伤专业委员会. 过伸性颈脊髓损伤诊疗临床循证指南[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 586-592. |
[4] |
薛宝宝 李军 祝勇刚 邹继伟 杨照 徐超 毕龙 薛英森 赵广跃. 腓肠肌内侧头肌瓣转移联合膜诱导技术治疗合并骨缺损的胫骨中上段前内侧Gustilo-Anderson ⅢB损伤[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 593-599. |
[5] |
朱跃良 蔡明 徐永清. 骨外固定减张牵引对肢体创面愈合的作用[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 600-605. |
[6] |
刘艾琳 陈为民 彭峰 张莉 贾潇天 虞聪 陈琳. 高频超声诊断肱骨干骨折合并桡神经高位损伤的价值[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 606-612. |
[7] |
程琳 沙艳东 杜伟力 陈忠 沈余明. 不同皮瓣修复骶尾部创面的效果比较[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 613-617. |
[8] |
郝定均 贺宝荣 闫亮 都金鹏 亓晓 于石成 张娇娇 郑文静 张荣强 黄大耿 杨俊松 朱铭 欧阳佳伟 赵赫 丁柯元 师浩东 曹阳 张鹰 唐清华 刘元 张子龙 等. 2018年中国创伤性脊髓损伤流行病学特点[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 618-627. |
[9] |
商广前 项帅 张鹏军 王鹏 张海宁 王英振 徐浩. 3D打印骨小梁金属臼杯用于全髋关节置换翻修术的效果[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 628-634. |
[10] |
马玉海 刘彧 陈长松 胡晓华 尹华东 何剑星 朱晓峰 邬春虎. 自体带骨膜髂骨移植治疗重度距骨软骨损伤[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 635-640. |
[11] |
白真龙 周哲坤 张广程 胡庆翔 黄燕峰 程邦君 张晓峰 陈道运 余伟林 何耀华. 关节镜下喙突转位缝线钢板固定术治疗复发性肩关节前向不稳[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 641-645. |
[12] |
章兵 李功科 王玉荣 吴飞 时素琴 冯庆玲 杭欣 苗润丰 夏乐 段成 冷俊岭 李勇. 多发肋骨骨折患者早期气管切开时机及预后的相关因素分析[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 646-652. |
[13] |
赵海波 赵夏 高甲科 宋文联 单正宜 于腾波 张英泽. 间充质干细胞来源的外泌体对肌腱细胞损伤修复的影响及其机制[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 653-661. |
[14] |
袁洁 何凌霄 廖灯彬 龚仁蓉 蒋艳. 国外创伤高级实践护士培养现状及其借鉴价值[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 662-665. |
[15] |
李石旦 王绍川 李又彬 谢晓瑜 邢伟 费军. 骨感染导致骨稳态失衡的分子机制研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(7): 666-672. |
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