|
|
|
| 抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14减轻谷氨酸兴奋性毒性神经元损伤的机制 |
| 庄泽锐 刘明发 骆健明 许宏武 张冰娜 余汉辉 吴逸 许海雄 |
|
|
|
摘要 目的 探讨抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）表达对减轻谷氨酸兴奋性毒性进而发挥神经元保护的作用机制。 方法 慢病毒介导MAPK14干扰载体由上海吉凯基因化学技术有限公司合成，星形胶质细胞从出生48 h的SD大鼠获取，通过慢病毒介导转染体外培养的星形胶质细胞，按照随机数字表法分为三组：（1）未转染组，为正常星形胶质细胞，细胞加入杜氏培养液（DMEM）进行培养；（2）阴性对照组，转染MAPK14空载干扰载体；（3）慢病毒转染组，转染MAPK14干扰载体。转染72 h后星形胶质细胞与神经元共培养48 h，随后构建谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h。检测指标包括：慢病毒载体转染星形胶质细胞最佳转染指数（MOI）；rPCR检测转染72 h后MAPK14和谷氨酸转运蛋白1（GLT‑1）mRNA表达水平；Western blot检测转染72 h后MAPK14及GLT‑1蛋白表达
水平；分光光度法和流式细胞术分别检测谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h后神经元乳酸脱氢酶（LDH）水平和神经元死亡率。 结果 （1）慢病毒转染星形胶质细胞最佳MOI值为30，转染后的星形胶质细胞生长良好。（2）转染72 h后，与未转染组（0. 013 1±0. 001 1）和阴性对照组（0. 013 9±0. 001 0）比较，慢病毒转染组MAPK14 mRNA表达水平（0. 005 7±0. 000 6）显著下降（P<0. 01）；与未转染组（0. 008 7±0. 000 3）和阴性对照组（0. 008 9±0. 001 1）比较，慢病毒转染组GLT‑1 mRNA 表达水平（0. 009 1±0. 001 2）未见明显变化（P>0. 05）。（3）转染72 h 后，与未转染组（0. 61±0. 05）和阴性对照组（0. 63±0. 01）比较，慢病毒转染组MAPK14 蛋白表达水平（0. 29±0. 04）显著下降（P<0. 01）；与未转染组（0. 20±0. 03）和阴性对照组（0. 23±0. 09）比较，慢病毒转染组GLT‑1蛋白表达水平（0. 73±0. 06）显著上升（P<0. 01）。（4）谷氨酸兴奋毒性作用2 h后，慢病毒转染组LDH水平［（109. 67±2. 40）U/L］较未转染
组［（141. 52±3. 88）U/L］和阴性对照组［（141. 29±3. 61）U/L］显著降低（P<0. 01），慢病毒转染组神经元死亡率［（38. 72±0. 26）%］较未转染组［（52. 94±1. 36）%］和阴性对照组［（54. 30±1. 23）%］显著降低（P<0. 01）。 结论 慢病毒介导MAPK14干扰载体转染星形胶质细胞后能上调GLT‑1表达水平、促进谷氨酸重摄取，从而减轻神经元谷氨酸兴奋性毒性，可为进一步利用星形胶质细胞基因调节减轻创伤性脑损伤后谷氨酸兴奋性毒性神经元损伤提供新的实验依据。
|
|
|
|
| [1] |
徐永清 范新宇. 穿支皮瓣创面修复中存在的争议问题[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 769-772. |
| [2] |
杨亮 巨积辉 周荣 郭礼平 王健. 股前外侧肌皮瓣序贯腓骨瓣修复足部复合组织缺损的疗效[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 773-779. |
| [3] |
胡浩良 陈宏 李苗钟 李学渊. CT血管造影辅助下以旋股外侧动脉斜支血管为蒂的游离股前外侧穿支皮瓣修复四肢软组织缺损[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 780-785. |
| [4] |
刘春 杨学林 胡福兴 王强. 三维CT血管造影辅助血管定位设计游离腓动脉穿支皮瓣修复前足背软组织缺损[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 786-792. |
| [5] |
梅良斌 吕乾 范新宇 石岩 何晓清 朱跃良 徐永清. 腓动脉低位穿支螺旋桨皮瓣转位修复足跟部软组织缺损[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 793-798. |
| [6] |
王乾坤 申才良 李俊杰 李勇 陈亮 罗彬. 股前外侧皮瓣联合大隐静脉移植治疗肘部大面积软组织缺损伴肱动脉栓塞[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 799-804. |
| [7] |
戚建武 陈邵 陈川 孙斌鸿 柴益铜 黄剑 李一 杨科跃 孙赫阳 陈宏. 游离旋髂浅动脉皮瓣联合股前外侧皮瓣修复手部大面积皮肤缺损的疗效[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 805-810. |
| [8] |
韩增帅 孙申杰 宋文联 商广前 赵夏 戚超 于腾波. 关节镜下改良与传统无结缝线桥技术修复肩袖撕裂的疗效比较[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 811-817. |
| [9] |
贾鹏 王宏川 石博文 舒衡生. 环形外固定架与髓内钉治疗胫骨节段性骨折的疗效比较[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 818-824. |
| [10] |
宋宏晖 张鹏 徐炜 王伟 姜习凤 徐又佳 金佳. 加速康复外科管理模式对高龄髋部骨折患者护理效果评价[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 825-832. |
| [11] |
赵楚南 张景宇 戴双双 刘阳珷玥. 脑肠轴在创伤性脑损伤中的作用及机制研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 841-847. |
| [12] |
陈晓俊 郭骏飞 贾会扬 王宸 郭家良 王鑫贵 赵阔 侯志勇 张英泽. 骨折相关张力性水泡形成机制及治疗的研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 848-854. |
| [13] |
杨佛强 吴晓敏 潘晓华. 人工智能在创伤评分中应用的研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 855-861. |
| [14] |
黄海 张喜财 张振. 老年股骨转子间骨折合并真性红细胞增多症一例[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(9): 862-864. |
| [15] |
顾玉东. 回顾历程，展望未来，再创辉煌[J]. 中华创伤杂志, 2021, 37(8): 673-674. |
|
|
|
|
