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摘要 目的 探讨胸部爆震伤后氧化应激反应对小鼠认知功能的影响。 方法 选取60只C57BL/6雄性小鼠,按随机数字表法分为空白对照组(15只)和胸部爆震伤组(45只),胸部爆震伤组又分为伤后1、3、7 d进行后续实验。采用自主研发的爆震伤装置制备胸部爆震伤小鼠模型。采用Toklu评分评价行为学改变;Morris水迷宫试验评价空间记忆能力变化;HE染色观察额叶皮层和海马区病理学变化情况;组织活性氧(ROS)检测试剂盒检测额叶皮层和海马区 ROS 表达情况;Western blot 法评估额叶皮层和海马区氧化应激丙二醛(MDA)和环氧化酶 2(COX2)变化情况。 结果 胸部爆震伤组伤后1 d Toklu 评分为(6. 7±2. 1)分,显著高于空白对照组的(2. 0±0. 0)分、胸部爆震伤组伤后 3 d 的(2. 7±
1. 2)分和伤后7 d的(2. 0±0. 0)分(P均<0. 01);胸部爆震伤组伤后3、7 d与空白对照组比较,差异无统计学意义(P 均>0. 05)。Morris 水迷宫试验结果表明,胸部爆震伤组伤后 1、3 d 的潜伏期分别为60. 1(60. 1,60. 1)s、60. 1(56. 3,60. 1)s,显著长于空白对照组的 10. 1(3. 9,18. 3)s(P 均<0. 01);胸部爆震伤组伤后 7 d的潜伏期为 60. 1(30. 5,60. 1)s,与空白对照组差异无统计学意义(P>0. 05)。胸部爆震伤组伤后 1、3、7 d比较,差异无统计学意义(P均>0. 05)。空白对照组额叶皮层和海马区锥体细胞形态规则,细胞核呈深染并清晰可见,细胞质均匀。胸部爆震伤组伤后各时间点额叶皮层出现不同程度的锥体细胞坏死,海马区细胞质强烈嗜酸细胞增多。胸部爆震伤组伤后 3 d额叶皮层 ROS水平为(10. 43±0. 36)RFU/mg,伤后 7 d 为(2. 91±0. 35)RFU/mg,较空白对照组的(0. 70±0. 01)RFU/mg 显著升高(P<0. 05 或 0. 01);胸部爆震伤组伤后 3 d 额叶皮层 ROS 水平显著高于伤后 1 d 的(2. 13±0. 65)RFU/mg和伤后7 d(P均<0. 01),伤后7 d的额叶皮层ROS水平与伤后1 d差异无统计学意义(P>0. 05)。胸部爆震伤组伤后3 d海马区ROS水平为(5. 39±0. 79)RFU/mg,伤后7 d为(5. 65±1. 17)RFU/mg,较空白对照组的(0. 73±0. 06)RFU/mg 和胸部爆震伤组伤后 1 d 的(2. 33±0. 02)RFU/mg 显著升高(P 均<0. 01);胸部爆震伤组伤后3 d的海马区ROS水平与伤后7 d比较、空白对照组海马区ROS水平与胸部爆震伤组伤后 1 d比较,差异无统计学意义(P 均>0. 05)。额叶皮层与海马区之间 ROS 表达水平比较,胸部爆震伤组伤后 3、7 d 差异有统计学意义(P 均<0. 01),空白对照组与胸部爆震伤组伤后 1 d 差异无统计学意义(P 均>0. 05)。Western blot结果表明,胸部爆震伤组伤后1、3、7 d额叶皮层MDA水平分别为0. 73±0. 04、0. 83±0. 04、0. 99±0. 06,显著高于空白对照组的0. 56±0. 04(P<0. 05或0. 01);胸部爆震伤组伤后 7 d 额叶皮层 MDA 水平与伤后 1、3 d 比较,差异有统计学意义(P<0. 05 或0. 01),伤后 3 d与伤后 1 d比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。胸部爆震伤组伤后 1、3、7 d额叶皮层COX2 水平分别为 2. 93±0. 02、4. 82±0. 15、4. 76±0. 06,显著高于空白对照组的 1. 93±0. 06(P 均<0. 01);胸部爆震伤组伤后3、7 d额叶皮层COX2水平与伤后1 d比较,差异有统计学意义(P均<0. 01),伤后7 d与伤后3 d比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。胸部爆震伤组伤后1、3、7 d海马区MDA水平分别为0. 92±0. 11、0. 83±0. 03、0. 68±0. 03,显著高于空白对照组的0. 49±0. 03(P均<0. 01);胸部爆震伤组伤后7 d海马区MDA水平与1 d和3 d比较,差异有统计学意义(P<0. 05或0. 01),伤后3 d与伤后1 d 比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。胸部爆震伤组伤后 1、3、7 d 海马区 COX2 水平分别为 0. 88±0. 06、0. 87±0. 06、0. 80±0. 06,显著高于空白对照组的 0. 37±0. 04(P 均<0. 01);胸部爆震伤组伤后1、3、7 d比较,差异无统计学意义(P均>0. 05)。额叶皮层与海马区之间的MDA 表达水平比较,胸部爆震伤组伤后1、7 d差异有统计学意义(P均<0. 01),空白对照组与胸部爆震伤组伤后1 d差异无统计学意义(P 均>0. 05)。额叶皮层与海马区之间的 COX2 表达水平比较,各组间差异有统计学意义(P 均<0. 01)。 结论 胸部爆震伤后小鼠短时期内会出现认知功能障碍,氧化应激反应是导致认知功能障碍发生的重要因素之一,并且认知相关的额叶皮层损伤重于海马区。
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