|
摘要 目的 探讨大鼠脊髓损伤后线粒体自噬和凋亡相关蛋白的表达变化及其发生机制。 方法 将96只健康雌性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(48只)和脊髓损伤组(48只),每组分为 1、3、7、14、21、28 d共 6个时间点,各时间点 8只。假手术组将 T8~9棘突及椎板切除但不损伤脊髓,脊髓损伤组采用Allen法建立脊髓损伤模型。采用BBB评分评估两组伤后各时间点运动功能;HE染色观察两组伤后各时间点脊髓组织病理学改变;免疫荧光观察两组伤后各时间点电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)分别与微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、E3泛素连接酶(Parkin)、多泛素结合蛋白(p62)共定位阳性细胞情况;Western blot法检测两组各时间点线粒体LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、细胞质Parkin、线粒体Parkin、细胞质 p62、线粒体 p62、细胞质细胞凋亡蛋白(Bax)、线粒体 Bax、细胞质细胞色素 C(Cyt C)、线粒体Cyt C的表达情况。 结果 (1)假手术组伤后各时间点BBB评分均为(21. 00±0. 00)分,脊髓损伤组伤后1、3、7、14、21、28 d BBB评分分别为(0. 94±0. 50)分、(1. 69±0. 70)分、(4. 13±0. 99)分、(11. 81±1. 03)分、(15. 06±1. 12)分、(18. 38±0. 83)分(P<0. 01)。(2)与假手术组比较,脊髓损伤组伤后1、3 d 脊髓组织结构明显破坏,可见大量出血灶,炎性细胞浸润,神经元肿胀,空洞形成;伤后 7、14 d出血灶较前明显减少,神经元胞体肿胀,炎性细胞浸润,存在大量空洞;伤后21、28 d可见大量细胞参与修复,细胞排列紊乱。(3)与假手术组比较,脊髓损伤组伤后 1、3 d VDAC1 分别与 LC3Ⅱ、Parkin、p62共定位阳性细胞数明显增多,此后共定位阳性细胞数逐渐减少。(4)假手术组和脊髓损伤组伤后1、3、7、14、21、28 d 线粒体 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达量分别为 0. 56±0. 05 和 1. 00±0. 05、1. 19±0. 11、0. 86±0. 05、0. 80±0. 08、0. 66±0. 13、0. 51±0. 11,细胞质Parkin表达量分别为0. 80±0. 13和0. 47±0. 08、0. 29±0. 06、0. 57±0. 07、0. 70±0. 05、0. 97±0. 09、0. 88±0. 12,线粒体Parkin表达量分别为0. 67±0. 09和1. 07±0. 18、1. 27±0. 15、0. 82±0. 12、0. 59±0. 09、0. 53±0. 13、0. 57±0. 14,细胞质 p62 表达量分别为 1. 25±0. 08 和 1. 04±0. 04、0. 94±0. 05、1. 09±0. 05、1. 19±0. 06、1. 20±0. 04、1. 27±0. 05,线粒体 p62 表达量分别为0. 61±0. 06和0. 88±0. 07、1. 09±0. 09、0. 98±0. 07、0. 70±0. 08、0. 68±0. 08、0. 60±0. 09,细胞质Bax表达量分别为 0. 92±0. 08 和 0. 67±0. 07、0. 36±0. 08、0. 48±0. 08、0. 69±0. 06、0. 88±0. 11、0. 94±0. 08,线粒体 Bax 表达量分别为 0. 57±0. 04 和 0. 74±0. 04、0. 91±0. 05、0. 76±0. 05、0. 63±0. 08、0. 61±0. 05、0. 57±0. 05,细胞质 Cyt C 表达量分别为 0. 28±0. 05和 0. 81±0. 07、1. 12±0. 08、0. 64±0. 07、0. 67±0. 13、0. 60±0. 11、0. 37±0. 06,线粒体 Cyt C 表达量分别为 1. 02±0. 07和 0. 91±0. 14、0. 37±0. 07、0. 73±0. 06、0. 91±0. 11、0. 95±0. 13、1. 10±0. 15。与假手术组比较,脊髓损伤组线粒体 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ在伤后 3 d表达最高,细胞质 Parkin 在伤后 3 d表达最低,线粒体 Parkin 在伤后 3 d表达最高,细胞质 p62在伤后3 d 表达最低,线粒体 p62 在伤后 3 d 表达最高,细胞质 Bax 在伤后 3 d 表达最低,线粒体 Bax 在伤后3 d 表达最高,细胞质 Cyt C 在伤后 3 d 表达最高,线粒体 Cyt C 在伤后 3 d 表达最低。 结论 大鼠脊髓损伤后线粒体自噬及凋亡均增强,其发生机制可能是由于细胞质 Parkin、p62 转移至受损线粒体以增强线粒体自噬,而 Bax 从细胞质转移至受损线粒体内,促使线粒体中大量释放 Cyt C 以增强细胞凋亡。
|
|
|
[1] |
范凡 冯军峰 陈鑫 韩凯伟 黄贤键 李春涛 刘子源 钟春龙 陈礼刚 陈文劲 董斌 段继新 方文华 冯光 高国一 高亮 杭春华 贺礼进 侯立军 黄齐兵 江基尧 等. 成人创伤性脑脊液漏诊治中国专家共识(2023版)[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 769-779. |
[2] |
王谦 何红晨. 基于富血小板血浆的再生康复技术在运动损伤中的应用[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 780-785. |
[3] |
艾绍龙 王谦 李凯文 林星镇 李娜 蒋红英 何红晨. 超声可视化富血小板血浆治疗运动损伤后腰背部肌筋膜疼痛综合征的早期临床疗效[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 786-792. |
[4] |
程强 骆虎 孙文爽 孟嘉. 关节镜下肩峰成形术联合富血小板血浆与关节镜下肩峰成形术治疗肩峰下撞击综合征的疗效比较[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 793-800. |
[5] |
温志嘉 刘伟乐 郑少伟 黄守镔 钟浩博. 关节镜下缝线联合穿肌腱双重复位纽扣钢板技术治疗后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 801-806. |
[6] |
毕航川 段浩 李登辉 阎容稷 蒋罡 沈相霖 舒钧 太祥 杨建义 赵双林 王志华. 机器人辅助单侧穿刺与徒手单双侧穿刺椎体后凸成形术治疗骨质疏松性胸腰椎骨折的疗效比较[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 807-815. |
[7] |
陈光子 方忠 李锋 熊伟 马天 刘朝旭. 3D打印导航模板辅助与徒手颈后路置钉内固定治疗寰枢椎骨折的疗效比较[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 816-822. |
[8] |
祝斌 蔡晓明 李俊杰 陈益 张健 竺枫 王欣. 关节镜下带线锚钉套圈缝合法修复三角纤维软骨复合体尺侧撕裂[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 823-829. |
[9] |
宋翔宇 陈蕾佳 贾志博 管延军 崔梦一 王恺 杨博尧 陈胜峰 许文静 董阳辉 赵亚群 彭江. 亚低温顺行机械灌注对犬缺血性脑损伤脑组织的保护作用[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 830-839. |
[10] |
叶志远 赵旭珅 周晓中. 强直性脊柱炎合并脊柱骨折诊疗方法的研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 840-846. |
[11] |
张玉方 段红杰 白海良 孙冉 云慧婷 张政. 失血性休克致血管内皮糖萼损伤的机制及防治措施研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 847-856. |
[12] |
周密 钟昊 柳松 邢琮 宁广智. 智能精准辅助技术在脊髓电刺激治疗脊髓损伤中应用的研究进展[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 857-864. |
[13] |
. 中文目录[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 1-2. |
[14] |
. 英文目录[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(9): 3-4. |
[15] |
. 中文目录[J]. 中华创伤杂志, 2023, 39(8): 1-02. |
|
|
|