嗜酸乳杆菌改善创伤性脑损伤小鼠肠道平滑肌收缩功能的作用及可能机制
孙波1,4 胡琛2 麻媛媛3 朱京慈4
1 山东大学齐鲁医院急诊科， 济南 250012； 2 重庆市中医院脑病科 400021； 3 陆军第75集团军医院重症医学科， 大理 671000； 4 陆军军医大学护理学院基础护理学教研室， 重庆 400038
Role and molecular mechanism of Lactobacillus acidophilus in improving intestinal smooth muscle contraction in mouse with traumatic brain injury
Sun Bo, Hu Chen, Ma Yuanyuan, Zhu Jingci.
摘要 目的 初步探讨嗜酸乳杆菌改善创伤性脑损伤（TBI）小鼠肠道平滑肌收缩功能的作用及可能机制。 方法 按照随机数字表法将90只C57BL/6雄性小鼠分为假伤组、TBI组、TBI+嗜酸乳杆菌组，每组30次。TBI组、TBI+嗜酸乳杆菌组采用改良的Feeney自由落体撞击法建立TBI后肠动力不足模型，假伤组只开颅骨骨窗不进行打击。假伤组及TBI组灌胃0.5 ml嗜酸乳杆菌培养基，TBI+嗜酸乳杆菌组灌胃0.5 ml嗜酸乳杆菌混悬液（约含菌1×1010 CFU）。各组每天灌胃1次，其余时间自由饮食水。分别在伤后1，3，7 d取末端回肠组织（距离盲肠1.5 cm），免疫组化染色检测磷酸化20 kDa肌球蛋白轻链（p-MLC20）水平，ELISA法检测肌球蛋白轻链激酶（MLCK）活性及L型电压依赖性钙离子通道α1C亚基（Cav1.2）、三磷酸肌醇受体（IP3R）、兰尼碱受体3（RyR3）蛋白表达。 结果 （1）TBI组1，3，7 d的p-MLC20水平为(530.6±101.5)ng/ml、(566.8±86.9)ng/ml、(635.2±129.6)ng/ml， 较假伤组的(813.7±148.9)ng/ml、(802.6±151.2)ng/ml、(805.5±139.9)ng/ml显著降低（P均<0.05）；而TBI+嗜酸乳杆菌组1，3，7 d 的p-MLC20水平为 (790.7±59.4)ng/ml、(769.8±85.4)ng/ml、(731.8±82.9)ng/ml，显著高于TBI组（P均<0.05）。（2）TBI组1， 3， 7 d的MLCK活性为(29.4±5.0)U/L、(31.2±3.4)U/L、(30.7±2.4)U/L，明显弱于假伤组的 (44.9±6.1)U/L、(44.6±1.7)U/L、(45.1±3.7)U/L（P均<0.05）；TBI+嗜酸乳杆菌组1，3，7 d 的MLCK活性为 (35.2±3.1)U/L、(38.7±3.9)U/L、(34.7±2.9)U/L，较TBI组明显增强（P均<0.05）。（3）TBI组1， 3， 7 d 的Cav1.2表达量为 (1.7±0.4)ng/L、(2.3±0.4)ng/L、(2.9±0.5)ng/L，明显低于假伤组的 (5.8±0.6)ng/L、(5.6±0.6)ng/L、(5.7±0.7)ng/L （P均<0.05）；TBI+嗜酸乳杆菌组1，3，7 d 的Cav1.2水平为 (2.8±0.6)ng/L、(4.7±0.6)ng/L、(4.9±0.5)ng/L，较TBI组明显升高（P均<0.05）。TBI组1， 3， 7 d 的IP3R表达量为 (12.4±2.5)μg/L、(15.7±3.0)μg/L、(16.3±3.1)μg/L，明显低于假伤组的(30.3±3.0)μg/L、(31.9±2.6)μg/L、(32.1±1.7)μg/L（P均<0.05）；TBI+嗜酸乳杆菌组1 d的IP3R表达量为(13.1±1.9)μg/L，与TBI组的(12.4±2.5)μg/L比较，差异无统计学意义（P>0.05）；TBI+嗜酸乳杆菌组3 d和7 d的IP3R表达量为(18.4±2.4)μg/L、(22.9±2.8)μg/L，较TBI组明显升高（P均<0.05）。TBI组1，3，7 d 的RyR3表达量为 (30.8±4.4)pg/ml、(29.1±3.6)pg/ml、(27.9±2.9)pg/ml，明显低于假伤组的 (43.5±3.2)pg/ml、(44.9±2.9)pg/ml、(44.2±2.0)pg/ml （P均<0.05）；TBI+嗜酸乳杆菌组1，3，7 d的RyR3表达量为(33.3±2.5)pg/ml、(30.4±2.3)pg/ml、(30.2±2.4)pg/ml，与TBI组比较，差异无统计学意义（P均>0.05）。 结论 嗜酸乳杆菌可提高TBI小鼠肠道平滑肌p-MLC20水平，增强MLCK活性，促进Cav1.2、IP3R、RyR3表达，从而保证钙依赖性通路信号的正常传导，可能是其改善TBI小鼠肠道平滑肌收缩的机制之一。
关键词 ：
乳杆菌 ,
嗜酸 ,
脑损伤 ,
肌 ,
平滑 ,
胃肠活动 ,
钙通道
基金资助: 国家自然科学基金（81272079）
通讯作者:
朱京慈， Email：zhujingci@163.com， 电话：13228687611
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