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| 复合全身低温治疗对大鼠重型创伤性脑损伤后氧化应激及神经功能恢复的影响及其作用机制 |
| 许海泽 邹永杰 邓磊 张先斌 张志鹏 温剑峰 龚存林 张有昆 秦荣 |
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摘要 目的 探讨复合全身低温治疗对大鼠重型创伤性脑损伤（sTBI）后氧化应激及神经功能恢复的影响及其作用机制。 方法 选取18只8周龄、体质量230~270 g的雄性SD大鼠，按随机数字表法分为对照组、冰毯治疗组和冰毯+冰盐水治疗组，每组6只。采用打开头顶骨窗后击打脑硬膜的方法构建TBI模型后，3组分别接受持续72 h的不同干预：对照组不予低温干预，维持体温37℃；冰毯治疗组用冰毯进行全身降温，维持体温在（34.0±0.5）℃；冰毯+冰盐水治疗组在冰毯治疗同时给予4℃冰盐水持续静脉滴注6 h。所有大鼠在标准环境下饲养，自由进食和饮水。治疗72 h后，采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估神经行为学表现；HE染色观察脑组织病理学变化；透射电镜观察神经元超微结构；TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡情况。采用ELISA法检测治疗0、24、48及72 h血清降钙素基因相关肽（CGRP）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平；治疗72 h后，采用免疫荧光染色和Western blot法检测脑组织中N‑甲基‑D‑天冬氨酸受体1（NMDAR1）和CGRP蛋白表达水平。 结果 治疗72 h后，与对照组相比，冰毯治疗组和冰毯+冰盐水治疗组mNSS均降低（P<0.05），且冰毯+冰盐水治疗组mNSS低于冰毯治疗组（P<0.05）。治疗72 h后，HE染色和透射电镜结果显示，对照组脑组织及超微结构损伤严重，冰毯治疗组脑组织结构病理学损伤有所减轻；而与冰毯治疗组相比，冰毯+冰盐水治疗组脑组织结构更为完整，神经元及髓鞘等超微结构损伤最轻。TUNEL染色结果显示，与对照组相比，冰毯治疗组和冰毯+冰盐水治疗组脑组织凋亡细胞数量均减少（P<0.05），且冰毯+冰盐水治疗组脑组织凋亡细胞数量少于冰毯治疗组（P<0.05）。ELISA结果显示，治疗0 h，3组血清CGRP、SOD和MDA水平差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗24、48及72 h，与对照组相比，冰毯治疗组和冰毯+冰盐水治疗组血清CGRP和MDA水平均降低（P<0.05），SOD水平均升高（P<0.01），且冰毯+冰盐水治疗组上述指标的改善幅度均高于冰毯治疗组（P<0.05）。治疗72 h后，免疫荧光染色和Western blot法检测结果显示，与对照组相比，冰毯治疗组和冰毯+冰盐水治疗组NMDAR1 和CGRP 蛋白表达水平均降低（P<0.05），且冰毯+冰盐水治疗组NMDAR1 和CGRP 蛋白表达水平均低于冰毯组治疗（P<0.05）。 结论 与单用冰毯治疗相比，冰毯联合冰盐水治疗可更有效改善sTBI大鼠的神经功能，减轻组织形态学损伤并抑制细胞凋亡。其神经保护机制可能与重塑氧化/抗氧化失衡、抑制兴奋性氨基酸毒性密切相关。
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