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摘要 目的 探讨柚皮苷对大鼠胫骨骨折早期愈合的促进作用及其机制。方法 24只6~8周龄SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组、骨折模型组、柚皮苷组、联合组，每组各6只。采用克氏针髓内固定法建立胫骨中段骨折模型。假手术组仅暴露胫骨而不截骨，骨折模型组则按上述步骤完成造模。柚皮苷组造模后腹腔注射柚皮苷 100 mg·kg-1·d-1。联合组造模后腹腔注射柚皮苷100 mg·kg-1·d-1+Wnt通路特异性抑制剂XAV-939 3 mg·kg-1·d-1，连续干预7、14 d。假手术组和模型组给予等量溶剂对照。术后7、14 d，通过正电子发射计算机断层显像（PET-CT）影像学及Lane-Sandhu评分评估骨折愈合情况；HE染色观察骨折部位骨痂形态；ELISA法检测骨痂骨钙素（OCN）、成骨特异性转录因子（OSX）、骨特异性碱性磷酸酶（BAP）和骨形态发生蛋白2（BMP-2）含量和血清白细胞介
素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；Western blot检测Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）通路相关蛋
白Wnt家族成员3A（Wnt-3α）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、β-catenin、磷酸化β-catenin（p-β-catenin）表达水平。结果 PET-CT影像学结果显示，术后7 d，假手术组骨皮质连续光滑，无骨折征象；骨折模型组骨折线清晰，骨痂很少；柚皮苷组骨折线模糊，骨性骨痂明显；联合组骨折线仍清晰，仅见少量软骨性骨痂。术后14 d，假手术组仍为正常骨结构；骨折模型组骨折线仍清晰，骨痂有限；柚皮苷组骨折线基本消失，骨性骨痂明显增多并致密；联合组骨折线仍可见，骨皮质未连接。假手术组因无骨折，Lane-Sandhu评分不适用。术后7、14 d，柚皮苷组Lane-Sandhu评分均高于骨折模型组（P<0.05）；联合组均低于柚皮苷组（P<0.05）；骨折模型组与联合组差异均无统计学意义（P>0.05）。HE染色结果显示，术后7 d，假手术组组织结构正常，无炎性浸润；骨折模型组大量纤维组织并伴少量软骨痂，骨小梁稀疏；柚皮苷组纤维组织减少，骨性骨痂和成熟骨小梁增多，破骨细胞增多；联合组以纤维组织增生和软骨痂为主，骨性骨痂极少且破骨细胞减少。术后14 d，假手术组骨组织结构保持完整，未见异常骨修复或炎性改变；骨折模型组表现为软骨痂部分钙化且骨小梁排列紊乱；柚皮苷组骨性骨痂增多，骨小梁致密且排列有序，破骨细胞增多，显示较成熟的成骨特征；联合组以软骨痂和未钙化纤维组织为主，骨性骨痂生成较少。术后7、14 d，骨折模型组OCN、OSX、BAP和BMP-2含量均较假手术组增加（P<0.01）；柚皮苷组均较骨折模型组增加（P<0.01）；联合组均较柚皮苷组减少（P<0.05）；联合组与骨折模型组差异均无统计学意义（P>0.05）。术后7 d，骨折模型组IL-6和TNF-α含量均较假手术组增加（P<0.05）；柚皮苷组均较骨折模型组减少（P<0.05）；联合组与柚皮苷组差异均无统计学意义（P>0.05）。术后14 d，各组间IL-6和TNF-α含量差异均无统计学意义（P>0.05）。术后7、14 d，骨折模型组Wnt-3α、cyclin D1和β-catenin表达水平均较假手术组升高（P<0.01），p-β-catenin均较假手术组下降（P<0.01）；柚皮苷组Wnt-3α、cyclin D1和β-catenin均较骨折模型组和联合组升高（P<0.01），p-β-catenin均较骨折模型组和联合组下降（P<0.01）；联合组与骨折模型组差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 柚皮苷能促进大鼠胫骨骨折早期愈合，其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路及升高下游cyclin D1表达水平，从而增加下游OCN和OSX含量，同时增加BMP-2与BAP含量有关，还可能与减少IL-6和TNF-α含量、减轻术后炎症反应有关。
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