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摘要 目的 探讨外泌体（Exo）源性miRNA-124（Exo-miRNA-124）对创伤性脑损伤（TBI）大鼠海马组织神经再生的促进作用。方法 采用携带miRNA-124的质粒与空载质粒对人胚胎肾细胞293（HEK293）进行转染，并通过RT-PCR验证转染效率。使用超高速离心法联合系统生物科技（SBI）试剂盒收集细胞培养液上清中的Exo-miRNA-124和空载Exo。应用纳米颗粒追踪系统分析Exo的粒径，Western blot检测Exo表面特异性标志物溶酶体相关膜蛋白3（CD63）的表达，RT-PCR检测Exo中miRNA-124表达。将120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、TBI组、TBI+空载Exo组和TBI+Exo-miRNA-124组，每组30只。采用液压打击装置构建TBI大鼠模型，建模后24 h TBI+空载Exo组和TBI+Exo-miRNA-124组分别经尾静脉注射空载Exo或Exo-miRNA-124，空白对照组和TBI组大鼠不做特殊处理。检测伤后3、7、28 d海马组织miRNA‑124表达水平；采用双标免疫荧光技术分析伤后7 d海马组织5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性（BrdU+）/性别决定区Y框蛋白2阳性（SOX2+）和伤后28 d海马组织BrdU+/神经元核抗原抗体阳性（NeuN+）神经干细胞（NSC）百分比。结果 从高表达miRNA-124与空载HEK293细胞系中提取的Exo在透射电镜下为直径约100 nm圆盘状膜性囊泡，表面特异性分子CD63呈高水平表达，Exo-miRNA-124内miRNA-124表达水平显著高于空载Exo。伤后3、7、28 d，与空白对照组相比，TBI组海马组织中miRNA‑124的表达水平均升高；与TBI组相比，TBI+空载Exo组海马组织中miRNA-124的表达水平均未升高（P>0.05）；与TBI+空载Exo组相比，TBI+Exo-miRNA-124组海马组织中miRNA-124的表达水平均升高（P<0.01）。伤后7 d，TBI组海马组织中BrdU+/SOX2+的NSC百分比大于空白对照组（P<0.05），TBI+空载Exo组与TBI组海马组织中BrdU+/SOX2+的NSC百分比差异无统计学意义（P>0.05），TBI+Exo-miRNA-124组海马组织中BrdU+/SOX2+的NSC百分比大于TBI组（P<0.01）。伤后28 d，TBI组海马组织中BrdU+/NeuN+的NSC百分比大于空白对照组（P<0.01），TBI+空载Exo组与TBI组海马组织中BrdU+/NeuN+的NSC百分比差异无统计学意义（P>0.05），TBI+Exo-miRNA-124组海马组织中BrdU+/NeuN+的NSC百分比大于TBI组（P<0.01）。结论 Exo-miRNA-124可通过尾静脉注射的方式被输送至TBI大鼠海马组织，能显著提升miRNA-124的表达水平，并有效增强海马组织中NSC的自我更新与增殖分化能力。
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