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| 磷酸钙骨水泥支架负载大黄素对成骨细胞成骨活性的影响 |
| 朱雷 贺宝荣 张鹰 王致远 田方 卢博涛 贾帅军 郝定均 |
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摘要 目的 探讨磷酸钙骨水泥（CPC）支架负载大黄素（EMO）对成骨细胞成骨活性的影响。 方法 首先制备骨水泥支架，将EMO粉末与CPC粉末（1∶9）均匀混合，加入柠檬酸搅拌后，注入聚四氟乙烯模具（EMO－CPC组）；将0. 36 g CPC粉末加入柠檬酸搅拌后，注入聚四氟乙烯模具（CPC组）。比较两组大体形貌、凝结时间（初凝时间和终凝时间）、可注射率及压缩强度。提取原代成骨细胞，并与两组支架共培养，通过扫描电镜观察两组共培养3 d后的表征；通过细胞活性与毒性检测试剂盒行活/死细胞染色和3－（4，5－二甲基噻唑－2）－2，5－二苯基四氮唑溴（MTT）比色法检测两组细胞存活率、毒性及增殖活力，并对两组支架行骨桥蛋白（OPN）免疫荧光染色，于倒置荧光显微镜下观察OPN蛋白荧光表达情况；共培养7 d后，通过四唑硝基蓝/5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐（NBT/BCIP）染色法行碱性磷酸酶（ALP）染色，观察两组成骨活性；共培养14 d后，采用茜素红染色法检测两组成骨活性。 结果 两组支架扫描电镜下均呈现相对光滑平整的形貌结构。EMO－CPC组初凝时间、终凝时间、可注射率及压缩强度与CPC组比较，差异无统计学意义（P > 0. 05）。扫描电镜显示，共培养3 d后成骨细胞集簇黏附于EMO－CPC支架表面，形态良好；EMO－CPC组细胞存活率达（98. 2 ± 0. 1）%，CPC组为（90. 2 ± 0. 1）%（P < 0. 05）；EMO－CPC组细胞增殖活力较CPC组更强（P < 0. 05）。OPN特异性染色显示，EMO-CPC组OPN蛋白荧光表达更强；共培养7 d后，EMO－CPC组ALP表达高于CPC组。共培养14 d后，EMO－CPC组茜素红染色强度更为显著，成骨活性更强。 结论 EMO-CPC支架较CPC支架具有更好的生物相容性、细胞增殖能力及成骨活性，为成骨细胞的生长提供了适宜的环境。
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